[:pb]UM ENSAIO DE ADESÃO OTIMIZADO PARA O ESTUDO DE INTERAÇÕES ENTRE MACRÓFAGOS E MATRIZ CONJUNTIVA BASEADO NO ENSAIO DE STAMPER-WOODRUFF.[:]

[:pb]Resumo: O objetivo deste trabalho é desenvolver um ensaio de adesão, baseado no ensaio de Stamper-Woodruff, para o estudo das interações entre macrófagos e matriz conjuntiva. Foram induzidos bolsões inflamatórios em camundongos da linhagem BALB/c para obtenção de secções de pele inflamada, e células macrofágicas da linhagem J774G.8 foram utilizadas na padronização do ensaio. Secções de 7 μm de espessura foram colocadas em lâminas de vidro, fixadas com acetona e bloqueadas com BSA. Foi estabelecida a concentração de 106 células/100 μl como a mais apropriada para a realização do ensaio, através de diluições seriadas. Células J774G.8 sem tratamento prévio ou tratadas com: ácido tetraacético diamino etileno, Mn++, lipopolissacarídeo, forbol miristato acetato, zimosan, os peptídios CS-1 e RGD, os anticorpos anti-CD49d ou contra a cadeia β2 de integrinas, foram adicionadas às secções e incubadas por 30 minutos à temperatura ambiente. Como resultado, as células macrofágicas aderem preferencialmente às áreas de inflamação. A adesão das células é dependente de cátions divalentes e pode ser modulada por substâncias que promovam a ativação celular. Além disso, a adesão mediada por integrinas pode ser inibida por peptídios RGD e CS-1 ou com anticorpos contra integrinas da família β1 e β2. A adesão das células macrofágicas é inibida mais intensivamente pela infecção com Leishmania mas não com a infecção por Mycobacterium ou por fagocitose de partículas de látex. Desta forma, o ensaio desenvolvido foi capaz de demonstrar a especificidade da adesão de células macrofágicas pela matriz conjuntiva bem como de sugerir a existência de mecanismos específicos de regulação das interações entre macrófagos e a matriz conjuntiva durante a infecção por Leishmania. Palavras-chave: Macrófagos, Moléculas de adesão, Tecido conjuntivo Orientador: Washington Luís Conrado dos Santos Financiador:  Disponível em: http://www.bahia.fiocruz.br/igmdisc/?id=43GPehM0XB3KqLI Defesa: 08/03/2001 Banca examinadora: Wilson Savino Luiz Freitas Lain Pontes de Carvalho Washington dos Santos[:]