Resumo:
A leishmaniose é uma doença tropical, negligenciada, causada por protozoários do gênero Leishmania sp. Diferentes espécies de Leishmania causam manifestações clínicas variadas, desde infecções auto-limitadas até aquelas que levam envolvimento visceral. A OMS estima que 350 milhões de pessoas vivem atualmente em área de risco para contrair alguma das diferentes formas desta doença de impacto global. Mundialmente ocorrem cerca de 2 milhões de novos casos, das diferentes formas clínicas, por ano. Os medicamentos para o tratamento da leishmaniose estão frequentemente associados a casos de resistência e graves efeitos colaterais. Assim, a busca de novas drogas é uma demanda premente. A curcumina, um composto natural demonstra atividade in vitro contra cepas de L. amazonensis. O dietilditiocarbamado de sódio (DETC), um antagonista de sistema antioxidante, aumenta a morte do parasito por macrófagos in vitro e é eficaz contra a leishmaniose em modelo murino. A utilização de combinações sinérgicas é estratégia farmacológica valiosa, uma vez que permite a utilização de dosagens mais baixas, reduzindo assim os efeitos colaterais e a possibilidade de seleção de parasitos resistentes. No presente trabalho, investigamos o efeito da combinação de curcumina e DETC contra L. amazonensis in vitro. A combinação de curcumina e DETC na proporção de 10:1, apresentaram valores de IC50 de 3.25 μM e 0,32 μM respectivamente. Análise em isobolograma indica efeito sinérgico quando a combinação atinge 25% e 50% de inibição. Os valores de CC50 para a combinação sobre células de mamíferos foram 23,51 μM e 2,35 μM para a curcumina e DETC, respectivamente. O índice de seletividade da combinação foi 7,23. A curcumina, DECT e sua combinação aumentaram a peroxidação lipídica em 1,42 e 1,94 e 2,75 vezes, respectivamente. As substâncias isoladas e a combinação não causaram a morte das células após 72h de tratamento com a IC50. Para inibição de 75%, as substâncias isoladas permaneceram citostáticas, enquanto a combinação foi citotóxica. As células foram lavadas após 24h para remover as substâncias e apenas de DETC manteve o efeito inibitório. Curcumina e combinação desencadearam marcação positiva para vacúolos autofágicos após 72h de tratamento. Quando avaliadas por microscopia eletrônica de transmissão, de modo geral, as células mostraram alterações mitocondriais e evidências de autofagia após os tratamentos. Finalmente, é possível considerar a combinação de curcumina e DETC como uma possível alternativa terapêutica para o tratamento da leishmaniose. No entanto, mais experimentos devem ser realizados para melhor determinar o mecanismo de ação e avaliação da atividade in vivo da combinação.
Palavras-chave:
Curcumina, DETC, Estresse oxidativo, Combinação de fármacos.
Orientador:
Dr. MARCOS ANDRE VANNIER DOS SANTOS
Financiador: Conselho Nacional de Pesquisa- CNPq
Defesa: 2016
Banca examinadora:
| Dr. Antonio Ricardo Khouri Cunha | 1º Examinador |
| Dr. Daniel Pereira Bezerra | 2º Examinador |
| Dr. Marcos André Vannier dos Santos | 3º Examinador |
DISSERTAÇÃO:Dissertação – V. final – Jacqueline de Jesus Silva